Korsprov: vad är de för, teknik och grund, faser

Tvärtesterna är en serie laboratorieundersökningar som utförs för att avgöra om blodprodukterna från en givare (huvudsakligen helblod och globulärt koncentrat) är kompatibla med mottagarens blod.

Det är ett komplementstest utöver ABO-kompatibiliteten och Rh-faktorn. Orsaken till cross-testing är att ibland två individer (givare-mottagare) kan ha samma ABO- och Rh-grupp men deras blod är fortfarande oförenligt.

Sådan inkompatibilitet beror på närvaron av antikroppar mot en serie röda blodkroppsproteiner kända som mindre antigener. Dessa antigener utvärderas inte rutinmässigt såsom görs med blodgrupp (ABO) och Rh-faktor.

Detta beror på att de mindre antigenen är mycket mindre frekventa och har ett variabelt uttryck i varje individ, därför är det praktiskt taget omöjligt att gruppera dem i kategorier som görs med gruppen och Rh-faktorn.

Istället blandas blodgivare från givare bland patientens serum (större kompatibilitetstest) och patientens röda blodkroppar med givarserum (mindre kompatibilitetstest) för att detektera förekomsten av antigen-antikroppsreaktioner.

När det finns antikroppar mot mindre antigener, antingen i patientens eller givarens serum, sägs testet vara positivt, så i de flesta fall kan den specifika bloden inte transfekteras.

ABO-gruppen

För att förstå väl att korsreaktioner behandlas först är det nödvändigt att veta grunderna om blodgrupper.

I den meningen är det viktigaste att veta att blod kan klassificeras i fyra grupper: A, B, AB och O.

Var och en av dessa grupper uttrycker på ytan av de röda blodkropparna ett visst protein (antigen) som identifieras som ett främmande element av antikropparna hos en potentiell receptor av en annan grupp.

Den mest slående av antigen-antikroppsreaktionerna i blodkompatibilitet är att ingen tidigare exponering för antigenet krävs för att antikroppar ska existera. Detta är känt som naturliga antikroppar.

Naturliga antikroppar

I allmänhet för att antikroppar ska existera i en individs kropp är det nödvändigt att vita blodkroppar tidigare har exponerats för antigenet.

Detta innebär att vid första kontakten mellan det främmande antigenet och organismen finns inga antikroppar, eftersom de genereras senare efter den första kontakten. Därför är det omöjligt för immunsystemet att ha antikroppar mot till exempel ett visst virus, om det inte tidigare har utsatts för det.

Det enda undantaget från ovanstående är anti-AB-antigenerna. I dessa fall har personen antikroppar mot antigenet att deras röda blodkroppar inte har ens om de aldrig har varit i kontakt med en annans röda blodkroppar. Detta är känt som naturliga antikroppar.

Antigener och antikroppar relaterade till blodgruppen

Blodgrupperna bestäms i fallet med ABO-systemet genom närvaron av specifika antigener (A eller B) i de röda blodkroppens membran och i motsats därtill antikroppar mot antigenet frånvarande i erytrocytmembranet.

Således uttrycker en person med blodgrupp A antigen A på ytan av sina röda blodkroppar medan i serumet finns anti-B-antikroppar.

Tvärtom finns, hos patienter i grupp B, antigen B, medan antikroppar är anti-A.

Nu har patienter med AB-blod både A- och B-antigener. Därför finns inga antikroppar, eftersom det skulle förstöra dennes röda blodkroppar.

Det motsatta uppträder i grupp O, där erytrocytmembranet inte uppvisar några av de två antigenerna (varken A eller B), medan i serumet finns anti-A- och anti-B-antikroppar.

ABO-gruppens inkompatibilitet

Av ovanstående kan förenligheten hos ABO-blodgrupperna lätt härledas, eftersom antigenet i erytrocytmembranet är automatiskt kända antikroppar i serumet. sålunda:

- Blod A är kompatibelt med grupp A och grupp O.

- Blodgrupp B är kompatibel med blod B och O.

- Människor med grupp O kan bara få blod O (eftersom de har anti-A och anti-B-antikroppar), även om deras blod tas emot av alla andra grupper utan problem eftersom det saknar antigener.

- Slutligen. De som har blodgrupp AB kan få blod från alla andra grupper (A, B, O och förstås AB), eftersom de inte har antikroppar mot något av antigenen. Bara AB-personer kan emellertid få AB-blod, eftersom alla andra grupper har antikroppar som skulle förstöra dessa röda blodkroppar.

Mindre antigener

Som med ABO-grupperna finns en serie proteiner som fungerar som antigener på ytan av erytrocyterna, vilket är fallet med antigenerna i ABO-gruppen.

Dessa antigener förekommer dock inte hos alla individer. Dess kombination är heterogen och penetranten (uttryckningsnivå för proteinet) är variabel, därför är det omöjligt att klassificera i grupper som den som existerar för ABO och Rh. Därifrån kommer det sitt namn från "mindre antigener", även känt som "lågt förekomst antigener".

Även om de inte är frekventa kan det finnas naturliga antikroppar mot mindre antigener. Bland dem är de vanligaste Lewis, MNSs, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb och Kidd. Alla ansvarar för mycket allvarliga hemolytiska och posttransfusionsreaktioner.

Dessutom kan det förekomma fall av sensibilisering mot mindre antigener genom föregående kontakt, antingen med nämnda antigena proteiner på grund av tidigare transfusioner eller på grund av tvärimmunitet.

Kors immunitet

Det sägs att det finns korsimmunitet när två antigener från två olika källor (till exempel en röd blodcell och en bakterie) är mycket lika, till den punkt att antikropparna mot ett av nämnda antigena proteiner också reagerar med varandra eftersom de är nästan identiska .

För att förstå det bättre, ta det tidigare hypotetiska exemplet (antigener i en röd blodcell och bakterier). I inget fall finns naturliga antikroppar, men om en person utsätts för bakterierna kommer de att generera antikroppar mot den.

Sådana antikroppar kommer att reagera senare mot en röd blodcell om antigenen i denna är mycket lik de bakterier som inducerar bildningen av antikropparna.

Om detta händer kan de röda blodkropparna med det specifika antigena proteinet inte administreras till den person som har antikropparna, eftersom det skulle vara avslag. Här ligger vikten av korsreaktioner.

Vad är korsproven för?

Eftersom det är omöjligt att karakterisera blodet hos olika individer i grupper på grundval av de mindre antigenen, är det enda sättet att veta om i en persons blod finns antikroppar mot de mindre antigenerna av den andra blodets röda blodkroppar genom korstesterna .

I de fall där antikropparna är närvarande utlöses en hemolys eller agglutineringsreaktion, så det sluts att reaktionen var positiv; det vill säga det finns antikroppar mot mindre antigener (även om det inte är känt exakt vad). I annat fall är testet negativt.

foundation

Tvärtesterna är baserade på antigen-antikroppsreaktionen. Därför är det med dem möjligt att detektera om i receptors serum finns antikroppar mot donatorens röda blodkroppar (eller vice versa) som inducerar en antigen-antikroppsreaktion.

Om det inte finns några antikroppar inträffar ingen reaktion och testet rapporteras som negativt. Omvänt, om reaktionen är positiv (det finns hemolys eller agglutination under testet) kan man dra slutsatsen att antikropparna är närvarande.

I detta avseende är det viktigt att notera att det kan finnas antikroppar mot röda blodkroppar i både givar- och mottagarserum. Detta är anledningen till att det finns två typer av korsreaktioner.

Typer av korsreaktioner

Det är möjligt att det finns antikroppar mot donor erythrocyter i patientens serum; men motsatsen kan också vara sant, det vill säga antikroppar i givarens serum mot patientens röda blodkroppar.

Därför finns det två typer av tvärprov:

- Större korsprov.

- Mindre korsprov.

Båda typerna utförs rutinmässigt i blodbanan före transfusion av blodprodukter, med tanke på att om någon av testerna är positiva föreligger en hög risk för transfusionsreaktioner som kan äventyra patientens liv.

Större korsprov

I detta test utvärderas det om det finns antikroppar mot donatorns röda blodkroppar i mottagarens serum.

Om detta händer kan blodprodukterna inte administreras, eftersom ett stort antal antikroppar som finns i patientens plasma snabbt kommer att förstöra donatorns röda blodkroppar och generera katastrofala reaktioner i mottagarens kropp i processen. Dessa reaktioner är så allvarliga att de kan hota ditt liv.

Mindre korsprov

I detta fall är det bestämt om det finns antikroppar i givarserum mot mottagarens röda blodkroppar.

Om så är fallet börjar antikropparna förstöra erytrocyterna hos receptom. Eftersom mängden antikroppar är begränsad är emellertid reaktionen mindre intensitet; även om det fortfarande är farligt.

faser

Både stora och mindre korsprov är indelade i tre faser:

- Salina.

- Termisk eller inkubation.

- Coombs.

I den första fasen blandas röda blodkroppar och serum i saltlösning. Efteråt tillsätts albumin och provet inkuberas vid 37 ° C i 30 minuter för att slutligen fortsätta med coombsfasen.

teknik

Tekniken för tvärprovning är relativt enkel, eftersom det innebär att donatorröda blodkroppar läggs till patientens serum (större tvärprov) liksom mottagare erythrocyter till givarens serum (mindre tvärprov).

För att inducera antigen-antikroppsreaktionen på en relativt kort tid måste en serie standardiserade steg följas. Dessa steg sammanfattas på ett förenklat sätt nedan.

Det är viktigt att komma ihåg att i det följande avsnittet beskrivs det större kompatibilitetstestet, även om stegen är desamma för det mindre kompatibilitetstestet, men utbyte av röda blodceller och serum.

Saltlösningsfas

- Lägg till ett provrör 2 droppar serum från mottagaren (från givaren om det är det mindre korsprovet).

Ta ett urval röda blodkroppar från givaren (från mottagaren om det är det mindre korsprovet).

- Tvätta och centrifugera de röda blodkropparna.

- Resuspenderas i en lösning mellan 3% och 5%.

- Placera en droppe av denna lösning i röret som innehåller mottagarens serum.

- Blanda försiktigt.

- Centrifug.

- Läs resultatet i displaylampan.

Termisk fas

- Lägg till 2 droppar 22% albumin till röret där saltlösningsfasen slutfördes.

- Inkubera vid 37 ° C i 30 minuter.

- Centrifugera i 15 sekunder.

- Läs resultatet i displaylampan.

Coombs-fasen

- Ta cellerna ur röret och tvätta dem med saltlösning.

- Ta bort supernatanten.

- Lägg till två droppar Coombs reagens.

- Blanda försiktigt.

- Centrifugera från 15 till 30 sekunder.

- Resuspendera cellerna och utvärdera i visualiseringslampan på jakt efter agglutination eller hemolys.

Om det förekommer agglutination eller hemolys i någon av faserna anses resultatet vara positivt.